什么是透射電子顯微鏡?
透射電子顯微鏡(TEM)屬于納米級高分辨率顯微鏡,利用電子束穿過樣品的原理,觀察物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。透射電子顯微鏡可放大幾萬至百萬倍,清晰觀察細(xì)胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)。
透射電子顯微鏡優(yōu)勢突出,拍攝效果立體感強(qiáng)、形貌逼真、分辨率高,能從同一樣品中獲得更多信息,有利于病毒、細(xì)胞、蛋白等檢定。透射電子顯微鏡可直接顯示病毒顆粒,用于定性、定量分析,檢測結(jié)果比其他方法更準(zhǔn)確和真實(shí)。
如何利用透射電子顯微鏡進(jìn)行生物學(xué)檢定?
目前TEM已廣泛用于細(xì)胞生物學(xué)、組織學(xué)、病毒學(xué)、病理學(xué)、分子生物學(xué)等諸多研究領(lǐng)域,是觀察和研究物質(zhì)超微結(jié)構(gòu)的強(qiáng)有力工具,尤其是藥物研發(fā)流程,TEM具有不可替代的作用。
超薄切片技術(shù)
透射電子顯微鏡要求樣品必須薄,厚度小于100nm。超薄切片技術(shù)是樣品制備最常見、最基本的技術(shù)之一。
超薄切片厚度為可達(dá)到50-70nm,用于觀察組織、細(xì)胞、病毒顆粒等超微結(jié)構(gòu)或內(nèi)部生物大分子的結(jié)構(gòu)。
超薄切片的制作過程基本上和石蠟切片相似,包括取材、固定、脫水、浸透、包埋、切片、染色等步驟。
義翹神州具有成熟的細(xì)胞超薄切片技術(shù),用于觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)和病毒粒子形態(tài)、數(shù)量,完美的呈現(xiàn)出細(xì)胞器形態(tài)結(jié)構(gòu)以及病毒粒子形態(tài)(如下圖)。
細(xì)胞核膜、線粒體
中心體、A型病毒粒子
C型病毒粒子
負(fù)染技術(shù)
負(fù)染技術(shù)操作簡單快速,直接對樣品勻漿懸浮液進(jìn)行染色。廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究,顯示生物大分子、細(xì)菌、病毒、分離的細(xì)胞器以及蛋白質(zhì)晶體等樣品的形狀、結(jié)構(gòu)、大小以及表面結(jié)構(gòu)特征。在病毒學(xué)研究中,負(fù)染技術(shù)優(yōu)勢更明顯。
多方面原因造成負(fù)染結(jié)果差,如染料與樣品不匹配、染色時間過長或過短、水洗不夠,造成背景深、樣品模糊等。義翹神州不斷優(yōu)化技術(shù),每一步都嚴(yán)格要求,可以完美展現(xiàn)樣品的形態(tài)(如下圖)。
乳膠粒子
VLP病毒顆粒
大腸桿菌
蛋白
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